Stiri - CULOAREA MARO A FIOLELOR DE TEST
CULOAREA MARO A FIOLELOR DE TEST
O intrebare care apare frecvent este cea referitoare la culoarea mediului continut de indicatorii biologici SGM dupa rularea unor cicluri prelungite de sterilizare. Studiile ce au fost executate raspund la intrebare si inlatura ingrijorarile clientilor ce au observat schimbarea de culoare folosindu-le.
De ce este fiola maro (bourbon)?
Culoarea “maro” observata este rezultatul degradarii mediului prin micsorarea Ph-lui datorita unei expuneri termice prelungite. Timpul necesar distrugerii sporilor este semnificativ mai mic decit cel care duce la schimbarea de culoare a mediului (maro). Mediul isi mentine culoarea mov la expunerea necesara pentru distrugerea sporilor. In imaginea atasata aveti o comparatie de culoare intre o fiola neexpusa, una expusa cu 65% mai mult si una pozitiva dupa incubare.
Va putea mediul degradat termic sa sustina cresterea unui numar mic de spori? DA! Toti indicatorii biologici sunt sisteme. Sporii nu pot fi separati de containerul in care sunt continuti. Oricum, SGM a verificat cresterea prin testarea in conformitate cu USP 26 prin inocularea a 10-100 spori in mediul ce a fost stresat termic pina la nivelul de distrugere termica completa a sporilor. Testele au fost pozitive, toate mostrele aratind turbiditate si schimbarea culorii catre galben stralucitor. Schimbarea de culoare a aparut dupa inocularea cu 10-100 spori si incubare.
Mediul degradat va suporta dezvoltarea unui numar mic de spori neexpusi termic, dar va suporta dezvoltarea unui numar mic de spori ce au rezistat tratamentului termic?
SGM a expus un set de fiole la temperatura suficienta pentru realizarea culorii “maro”. Doua loturi diferite de indicatori biologici au fost expuse la cel mai lung posibil ciclu de distrugere si la care este imposibila existenta de spori viabili. Nivelele mici de spori viabili au fost obtinute prin cultivarea pe medii agar. Mediul colorat “maro” a fost inoculat cu sporii si apoi incubat. Toate mostrele folosite din ambele loturi au arata crestere pozitiva (turbiditatea si culoarea indicatorului de Ph a devenit galbena), in mai putin de 48 ore.
Functionalitatea indicatorului de Ph este compromisa de expunerea la temperatura?
NU! Mediul a fost expus cu 30-50% mai mult. In acestea, inclusiv intr-un mediu neexpus a fost facutra o masuratoare de Ph. Mediile au fost titrate cu 1N HCL si o culoare galben a fost obtinuta in toate mostrele. Aproximativ aceeasi cantitate de acid a fost folosita pentru titrarea mostrelor. S-a facut o masuratoare de Ph si dupa titrarea cu acid.
Fiola pare sa aiba o tenta de galben in momentul scoaterii din incubator. Este posibil sa fie pozitiva si de-abia a inceput sa vireze spre galben?
Probabil nu. Este intotdeauna bine sa incubati o fiola de control negativ (o fiola fara spori) si una neexpusa pentru comparatie. Fiola ce nu contine spori trebuie sa fie supusa aceluiasi tratament termic ca si cele de test pentru o comparatie corecta a culorii. Citeodata fiolele “maro" par sa aiba o tenta de galben dar prin comparatia cu cea pozitiva, diferenta de culoare este evidenta. Orice fiola care a devenit pozitiva datorita sporilor ce au supravietuit sterilizarii va arata un galben vibrant asemanator cu cel al fiolei pozitive. Fiolele actuale isi schimba culoarea din mov in galben in circa 2 la 3 ore. Peste aceasta perioada, galbenul continua sa cistige in intensitate. Daca aveti dubii, continuati incubarea inca 2-3 ore.
Concluzii:
Testele executate demonstreaza ca fiolele expuse in conditii peste cele normale au pierderi ale culorii mov:
1) sunt inca capabile sa sustina dezvoltarea organismelor
2) sunt inca capabile sa functioneze ca indicator de culoare pentru cele 48 ore, si
3) nu au nici un fel de spori.
Se poate concluziona ca ele sunt pe deplin functionale chiar si in conditiile descrise mai sus. Folosirea fiolelor de control negativ se recomanda cind ciclul de sterilizare prelungit produce colorarea mediului. Fiola de control negativ este de folos cind este expusa in aceleasi conditii ca si fiolele de test. O comparatie directa a culorii intre fiole trebuie sa fie facuta pentru a determina daca schimbarea de culoare a fost ca urmare a degradarii mediului sau a unei activitati biologice.
De ce este fiola maro (bourbon)?
Culoarea “maro” observata este rezultatul degradarii mediului prin micsorarea Ph-lui datorita unei expuneri termice prelungite. Timpul necesar distrugerii sporilor este semnificativ mai mic decit cel care duce la schimbarea de culoare a mediului (maro). Mediul isi mentine culoarea mov la expunerea necesara pentru distrugerea sporilor. In imaginea atasata aveti o comparatie de culoare intre o fiola neexpusa, una expusa cu 65% mai mult si una pozitiva dupa incubare.
Va putea mediul degradat termic sa sustina cresterea unui numar mic de spori? DA! Toti indicatorii biologici sunt sisteme. Sporii nu pot fi separati de containerul in care sunt continuti. Oricum, SGM a verificat cresterea prin testarea in conformitate cu USP 26 prin inocularea a 10-100 spori in mediul ce a fost stresat termic pina la nivelul de distrugere termica completa a sporilor. Testele au fost pozitive, toate mostrele aratind turbiditate si schimbarea culorii catre galben stralucitor. Schimbarea de culoare a aparut dupa inocularea cu 10-100 spori si incubare.
Mediul degradat va suporta dezvoltarea unui numar mic de spori neexpusi termic, dar va suporta dezvoltarea unui numar mic de spori ce au rezistat tratamentului termic?
SGM a expus un set de fiole la temperatura suficienta pentru realizarea culorii “maro”. Doua loturi diferite de indicatori biologici au fost expuse la cel mai lung posibil ciclu de distrugere si la care este imposibila existenta de spori viabili. Nivelele mici de spori viabili au fost obtinute prin cultivarea pe medii agar. Mediul colorat “maro” a fost inoculat cu sporii si apoi incubat. Toate mostrele folosite din ambele loturi au arata crestere pozitiva (turbiditatea si culoarea indicatorului de Ph a devenit galbena), in mai putin de 48 ore.
Functionalitatea indicatorului de Ph este compromisa de expunerea la temperatura?
NU! Mediul a fost expus cu 30-50% mai mult. In acestea, inclusiv intr-un mediu neexpus a fost facutra o masuratoare de Ph. Mediile au fost titrate cu 1N HCL si o culoare galben a fost obtinuta in toate mostrele. Aproximativ aceeasi cantitate de acid a fost folosita pentru titrarea mostrelor. S-a facut o masuratoare de Ph si dupa titrarea cu acid.
Fiola pare sa aiba o tenta de galben in momentul scoaterii din incubator. Este posibil sa fie pozitiva si de-abia a inceput sa vireze spre galben?
Probabil nu. Este intotdeauna bine sa incubati o fiola de control negativ (o fiola fara spori) si una neexpusa pentru comparatie. Fiola ce nu contine spori trebuie sa fie supusa aceluiasi tratament termic ca si cele de test pentru o comparatie corecta a culorii. Citeodata fiolele “maro" par sa aiba o tenta de galben dar prin comparatia cu cea pozitiva, diferenta de culoare este evidenta. Orice fiola care a devenit pozitiva datorita sporilor ce au supravietuit sterilizarii va arata un galben vibrant asemanator cu cel al fiolei pozitive. Fiolele actuale isi schimba culoarea din mov in galben in circa 2 la 3 ore. Peste aceasta perioada, galbenul continua sa cistige in intensitate. Daca aveti dubii, continuati incubarea inca 2-3 ore.
Concluzii:
Testele executate demonstreaza ca fiolele expuse in conditii peste cele normale au pierderi ale culorii mov:
1) sunt inca capabile sa sustina dezvoltarea organismelor
2) sunt inca capabile sa functioneze ca indicator de culoare pentru cele 48 ore, si
3) nu au nici un fel de spori.
Se poate concluziona ca ele sunt pe deplin functionale chiar si in conditiile descrise mai sus. Folosirea fiolelor de control negativ se recomanda cind ciclul de sterilizare prelungit produce colorarea mediului. Fiola de control negativ este de folos cind este expusa in aceleasi conditii ca si fiolele de test. O comparatie directa a culorii intre fiole trebuie sa fie facuta pentru a determina daca schimbarea de culoare a fost ca urmare a degradarii mediului sau a unei activitati biologice.
